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Polysciences全國代理-上海鼎桑

Polysciences全國代理-上海鼎桑

更新時間:2021-03-10

產品特點:
Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
產品介紹
產地進口加工定制

我(wo)們公司zui大優勢是強大的采購

  上海(hai)鼎桑生物科技有限公司一家專注于生命科學(xue)的科技企(qi)業(ye)(ye),由在國內(nei)科研(yan)試劑領(ling)域有著豐富從業(ye)(ye)經驗的技術團隊和管(guan)理團隊組建而(er)成(cheng),專營進(jin)口生物試劑,科學(xue)儀器,實驗消耗品(pin)等。
       公司將不斷把上優(you)質的產品引(yin)入國內市場,滿(man)足(zu)客(ke)戶的需求(qiu),公司也將緊(jin)跟生(sheng)命(ming)科(ke)(ke)學(xue)的發(fa)展,為廣大(da)科(ke)(ke)研工作者探索(suo)生(sheng)命(ming)科(ke)(ke)學(xue)的奧秘(mi)奉獻綿薄之力.

Polysciences全國代理-上海鼎桑

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PEI轉染手冊

轉染操作流程:
 
  1、細胞傳代:

轉染前24h內分離293T細胞至含10%胎牛血清的DMEM培養基 中進行傳代培養,接種密度如下:
         6孔板:0.5x106細胞
         10cm培養皿:4.0x106細胞
         15cm培養皿:9.0x106細胞

2、轉(zhuan)染

轉染前將所有試劑(ji)置(zhi)于室溫。

2.1質粒DNA的(de)稀釋

在無菌試管中,用無血清的DMEM W / O酚紅培養基(濃度為10%)稀釋質粒DNA(ug)。病毒包裝體(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重組質粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。
       

6孔板:200ul+3ug的DNA
        10cm培養皿:1ml+7-8ug的DNA
        15cm培養皿:2ml+11-12ug的DNA

   2.2 轉染復合體形成

將PEI(1ug/uL)加入已稀釋的總DNA中,PEI與DNA(ug)的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。
      

 6孔板:9ul PEI復合體(1ug/ul)=9ug
        10cm培養皿:21ul PEI復合體(1ug/ul)=21ug
        15cm培養皿:33ul PEI復合體(1ug/ul)=33ug
將添加到細胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。


4、收(shou)獲(huo)轉染細胞(bao)

轉染后48小時內收獲轉染細胞/或病毒上清。
 
試劑的配制:
PEI(1ug/ul) Polysciences(CAT#23966-2配制成儲液:)
1、將無內毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI,冷卻到室溫。
2、調整pH值至7.0,用0.22um的濾器過濾消毒,分裝后儲存在-20℃。工作液可保持在4℃

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