23966上海鼎桑代理
更(geng)新時間:2021-03-10
23966上海鼎桑代理 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
產地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
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代理(li)優勢品牌(pai):tedpella 、Transgenomics(IDT) 突(tu)變(bian)檢(jian)測試劑盒 、mattek 培養皿(min) 、Megazyme 試(shi)劑盒、Avanti 標準品、Alzet 滲透壓泵(beng)、 DSHB抗體(ti)、moltox 菌株、Toxin Technology 毒素、Jena Bioscience、 Goldbio、teknova培養基、Altogen Biosystems 轉染試(shi)劑(ji)、Scientific Commodities PE管、Coriell Institute DNA和細胞 、List毒(du)素、BrainBits 培(pei)養(yang)基、Spectrum 膜、Neuromab 抗體(ti) 、BBI solutions膠體金 、braintree scientific 耗材(cai)pe管、AK Scientific抑制劑(ji)等(deng)、sutter 玻(bo)璃電(dian)極(ji)管(guan)、Reaschdiets小鼠食(shi)料
我們(men)公司zui大(da)優勢是(shi)強大(da)的采購:
上海鼎桑生物科技有限公司一家專注于(yu)生(sheng)命科(ke)學的(de)科(ke)技企業,由在國內科(ke)研試劑領域有著豐富(fu)從業經驗(yan)的(de)技術(shu)團隊(dui)和管理團隊(dui)組建(jian)而成(cheng),專營進口生(sheng)物試劑,科(ke)學儀器,實驗(yan)消耗品等。
公司(si)將不斷把上優質的(de)產品引入國內(nei)市場,滿足客戶(hu)的(de)需求,公司(si)也將緊跟生命科學(xue)的(de)發展,為(wei)廣(guang)大科研工作者探索生命科學(xue)的(de)奧秘奉獻綿薄之力(li).
23966上海鼎桑代理
美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的23966上海鼎桑代理 多聚化合物供(gong)應(ying)商,同時是世(shi)界*的免疫學,組織化學試劑耗材供(gong)應(ying)商.
上海鼎桑polysciences 23966大量(liang)現貨供(gong)應
轉染試劑線性PEI溶液的配制(1mg/ml)
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966轉染效率zui高。
下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產品特性及其溶液的配制過程。
1. 產品特(te)性:
產品名稱:線性聚乙烯亞胺(PEI)
CAS號 | 9002-98-6,26913-06-4 | 分子式 | (CH2CH2NH)n | 分子量 | 25000 |
熔點 | 73-75°C | 外觀 | 白色或黃色固體 | 結(jie)構式 |
|
溶(rong)解性 | 溶于熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;不溶于:苯,aether和(he)丙酮 | 儲存 | 室溫 |
2. 溶液配制
此指導說明書是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的后編寫的。下面推薦一種簡單適用而的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉染試劑的配制。
材料:
1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物級水)、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真(zhen)空無菌過濾器(qi)、無菌高聚乙烯(xi)(xi)或聚丙烯(xi)(xi)試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃(li)燒杯(bei)、1 L玻璃(li)量(liang)筒、核準(zhun)pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤(pan)、聚四氟乙(yi)烯(PTFE)攪(jiao)拌棒(bang)、真空泵
配制過程:
1g #23966——900mL水(shui)溶(rong)解——攪(jiao)拌(ban)(ban)、加(jia)熱(60-80°C)——加(jia)HCl調(diao)pH到(dao)2.0左右——蓋上燒(shao)杯,攪(jiao)拌(ban)(ban)3h(直至粉末*溶(rong)解)——冷卻至室溫(wen)——加(jia)NaOH調(diao)pH到(dao)6.9-7.1——移液到(dao)量筒,加(jia)水(shui)補(bu)足至1L——真空過濾消(xiao)毒——分裝,-20°C保存。
備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。
試劑儲存:
冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復凍融。
粉末儲存:
未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。
轉染操作流程:(瞬時轉染方法) 轉染效率(部分數據參考,本數據來源于網絡,不作為售后投訴依據)
1. 接種細胞: 轉染前一天,用膠原(yuan)酶(mei)(WORTHINGTONG 公司 LS004196)消化細
胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置
入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。
2. 準備 DNA-PEI 復合物: DNA、PEI 試劑(ji)和(he)稀(xi)釋(shi)劑(ji)在進行以下步驟前需先(xian)使(shi)其
升至室溫。,用 Opti-MEM ITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適
量 DNA。用同樣的培養基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性 PEI 轉
染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液 的試管,一邊將稀釋的線性 PEI 轉染試劑滴
加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置 10~25 min 以
形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14
mL 離(li)心管(guan)。
3. 轉染細(xi)胞: 直接向每個孔中(zhong)加入 DNA-PEI 復合物并輕輕渦(wo)旋(xuan)培(pei)養板/培(pei)養皿(min)。在
無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴 DNA-PEI 復
合物。轉染 3 h 后,添加½體積的包含 30%血清的生長培養基。
4. 孵育細(xi)胞和分析結果: 在 CO2 培(pei)養(yang)箱中 37℃下(xia)孵育細(xi)胞至可以分析檢測。轉
染后快 的話7 h 即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定適合檢測時間。
細胞種類 中文名稱 PEI 轉染效率
HEK293 人胚腎細胞(bao) 90%-95%
293-T 人胚腎細胞 90%-95%
CHO-K1 倉鼠卵巢細胞 80%-90%
U251 人源神經(jing)膠質瘤細(xi)胞 80%-90%
Hela 人源宮(gong)頸ai細胞 70%-80%
COS7 猴(hou) SV40 轉化腎(shen)細胞 70%-80%
HepG2 人源肝癌細胞 70%-80%
NIH/3T3 小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎成纖維細胞 60%-70%
膠質瘤干細胞 人源膠質瘤干細胞 60%-70%
Patu8988 人源胰腺(xian)癌細胞(bao) 60%-70%
U2OS 人(ren)源骨肉瘤細胞 60%-70%
轉染試劑和 DNA 配比數據
細胞型號 培養基 每孔細胞數 DNA 的量 轉染試劑量 和培養基混合 4-6h
293H DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
293FT DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
293E DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
293F DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
COS7 DMEM 1.5×10
4
0.4µg 0.5µL DMEM+10%FBS
hela DMEM 2×10
4
0.3µg 0.5µL 1640+15%FBS
Caco2 MEM 3.5×10
4
0.3µg 0.75µL MEM+10%FBS
BHK21 MEM 2×10
4
0.2µg 0.5µL MEM+10%FBS
CHO-DG44 DMEM+HT+pro 2×10
4
0.5µg 0.5µL DMEM+HT+pro +10%FBS
RAW264.7 DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM +10%FBS
MCF7
MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium
pyruvat
2×10
4
0.1µg 0.25µL
MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium
pyruvat+10%FBS
SW480 IMDM 3×10
4
0.4µg 0.5µL IMDM +10%FBS
MDCK DMEM 4×10
4
0.6µg 1µL DMEM+10%FBS
CHO-K1 IMDM+Pro 3×10
4
0.2µg 0.5µL IMDM+Pro +10%FBS
HepG2 DMEM 3×10
4
0.5µg 0.75µL DMEM+10%FBS
A549 DMEM 2×10
4
0.3µg 0.5µL DMEM+10%FBS
NIH/3T3 DMEM 1.5×10
4
0.1µg 0.75µL DMEM+10%FBS
vero DMEM 3×10
4
0.3µg 0.75µL DMEM+10%FBS
sf9 SIM SF 5×10
4
0.4µg 0.75µL SIM SF+10%FBS